小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞

產(chǎn)品簡介
小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞肺泡組織是機體暴露于外界環(huán)境的最大表面，哺乳動物肺臟由40多種不同類型細胞組成Ⅱ肺泡上皮細胞，為小的，立方形細胞，胞體較小，核圓，占上皮細胞的60%左右，占所有肺細胞的15%左右，但僅覆蓋5%的肺泡表面。處于小內(nèi)皮和間質細胞、大的巨噬細胞和Ⅰ型細胞之間。

產(chǎn)品型號：復蘇/凍存

更新時間：2025-06-30

廠商性質：生產(chǎn)廠家

訪問量：428

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小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞

產(chǎn)品名稱：小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞

產(chǎn)品貨號：YLK-XB0725h

組織來源：肺組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介：

Ⅱ型肺泡上皮細胞分離自肺組織。肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復分枝成無數(shù)細支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。小肺泡細胞，又稱I型肺泡細胞，厚約0. 1微米，基底部是基底膜，無增殖能力。大肺泡細胞，又稱Ⅱ型肺泡細胞，分泌表面活性物質(二棕櫚酰卵磷/脂) ，以降低肺泡表面張力。

Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間，數(shù)量較Ⅰ型肺泡細胞多，但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。

細胞核圓形，胞質著色淺、呈泡沫狀。電鏡下，細胞游離而有少量微絨毛，胞質內(nèi)富含線粒體和溶酶體，有較發(fā)達的粗面內(nèi)質網(wǎng)和高爾基復合體。核上方有較多的分泌顆粒，電子密度高、大小不等，直徑約0. 1-1. 0μm 顆粒內(nèi)含有平行排列的板層狀結構，稱為嗜餓性板層小體。小體內(nèi)的主要成分為磷脂，以二棕櫚酰卵磷/脂為主，此外還有糖胺多糖及蛋白質等。

顆粒內(nèi)物質釋放出來后，在肺泡表面形成一層粘液層，稱為表面活性物質(surfactant) 。表面活性物質有降低肺泡表面張力、穩(wěn)定肺泡大小的作用。呼氣時肺泡縮小，表面活性物質密度增加，表面張力降低，防止肺泡過度塌陷。吸氣時肺泡擴張，表面活性物質密度減小，肺泡回縮力加大，可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質的缺乏或變性均可引起肺不張，過度通氣可造成表面活性物質缺乏。吸入毒氣可直接破壞表面活性物質。Ⅱ型肺泡細胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能，故具有修復受損傷上皮的作用。

細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常肺組織。
2)細胞鑒定：肺表面活性蛋白A(SP-A)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式：鋪路石狀細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

質量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)

培養(yǎng) 基：含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài) ：上皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

傳代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95% 。C O2，5%

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4) 待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。

3. 細胞收貨脫落

1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。

3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。

4) 待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。

5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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